基于功能性离子纳米通道的酪氨酸磷酸化检测方法
2022-07-06 03:28:00
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导读 酪氨酸磷酸化 (pTyr) 可以启动细胞信号传导并控制细胞功能。它的失调与许多疾病有关,尤其是癌症。pTyr-的特异性检测对于开发靶向抗
酪氨酸磷酸化 (pTyr) 可以启动细胞信号传导并控制细胞功能。它的失调与许多疾病有关,尤其是癌症。pTyr-的特异性检测对于开发靶向抗癌药物很重要。
常用的检测pTyr的方法依赖于以[γ- 32 P]-ATP为底物的辐射测定法,其存在使用有害放射性试剂和产生放射性废物的问题。
还开发了基于抗体的方法和一些合成化学传感器,以实现对 pTyr 的特异性检测,用于激酶抑制剂筛选试验。然而,这些方法并不划算。
近日,由科学院大连化学物理研究所(DICP)清光彦教授领导的研究小组开发了一种基于功能性离子纳米通道平台的酪氨酸磷酸化特异性传感新方法。
结果于 9 月 7 日发表在《化学学会杂志》上。
通过模拟来自精氨酸残基的胍基与蛋白质中磷酸化残基的多重相互作用,研究人员设计了一种含有丰富胍基的功能性聚合物来修饰离子纳米通道基底,并开发出一种功能性纳米通道装置。
聚合物可以通过胍基团与PP中的磷酸基团结合来识别磷酸化肽(PP),并将这种识别放大到聚合物本身的构象变化。进一步将构象变化转化为纳米通道离子通量的“OFF-ON”变化,最终通过离子电流的变化实现对PP的检测。
当引入Ca 2+作为竞争性结合元件时,通过构建一个简单的纳米流体逻辑门来实现对 pTyr 肽与其对应物 pSer 和 pThr肽的特异性识别。
重要的是,出色的 pTyr 传感能力使功能性纳米通道可用于通过肽底物上的酪氨酸激酶实时监测 pTyr 过程,即使在复杂的条件下,监测激酶活性的概念验证研究证明了其在以下方面的潜力激酶抑制剂筛选。
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