分光光度计的使用方法和步骤(分光光度计的使用方法)
大家好,我是小东,我来为大家解答以上问题。分光光度计的使用方法和步骤,分光光度计的使用方法很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、【实验操作】 1.检查721A型分光光度计的旋钮和开关,使其回复零点。
2、 2.按要求接通电源,按下“T键”,打开暗盒盖和电源开关,指示灯亮。
3、预热20分钟。
4、 3.调节波长旋钮至所需波长。
5、 4.取比色皿分别盛装B、S、U液,置入检测室(比色皿先用蒸馏水洗后,再用比色液润洗才能装比色液)。
6、B液对准光路。
7、 5.调节面板“零位细调”,使指示为00.0,即透射比“T”的零点,同时“一”号闪跃。
8、 6.合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器,使指示为100.0,须反复5、6两点操作达到稳定。
9、 7.按下“A”键,指示为“.000”同时“一”闪跃,如果指示读数不是比值时,应调节“消光调零“电位器,使其达到要求。
10、 8.拉出或推入拉杆,使U、S液分别置于光路读取A值,然后移动拉杆,读B管A值,如为0,则前述A值有效。
11、 9.在稳定时,重复读数一次,并按下“T”键。
12、 10.打开检测室盖,取出比色皿,倾去比色液于水槽中,用自来水冲洗干净,倒置于表面皿(铺有滤纸)中。
13、 11.关上电源开关,拔出电源插头,取出比色皿架,检查检测室内是否有液体溅出,并擦净。
14、检测室内放入硅胶袋,合上盖,套上仪器罩。
15、 【计算】 1.利用标准管计算测定物含量 实际测定过程中,用一已知浓度的测定物按测定管同样处理显色,读取吸光度,再根据(6)式计算,即 A1= K1C1l1 A2= K2C2l2 式中AA2分别为已知浓度标准和未知浓度测定吸光度。
16、 cc2分别为已知浓度标准管和未知浓度测定管中测定物浓度。
17、 因盛标准液和测定液的比色杯径长相同(l1=l2),故上二式可写成: A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7) 因标准液和测定液中溶质为同一物,K值相同,即: (7)式可换算成下式: C2=(A2/A1)× C1 …………………………………………(8) 因测定液和标准液在处理过程中体积相同,故(8)式可写成: m2 =(A2/A1)וm1…………………………………………(9) 式中mm2分别表示标准液和测定液中待测物的含量。
18、 (9)式为实验操作中常用计算式。
19、 【注意事项】 1.仪器须安放在稳固的工作台上,不能随意搬动。
20、严防震动,潮湿和强光直射。
21、 2.盛装比色液时,约达比色皿2/3体积,不宜过多或过少。
22、若不慎使溶液流至比色皿外面须用棉花或拭镜纸擦干,才能放入比色架。
23、拉比色杆时要轻,以防溶液溅出,腐蚀机械。
24、 3.千万不可用手或滤纸等物摩擦比色皿的透光面。
25、 4.比色皿用后应立即用自来水冲洗干净,若不能洗净,用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡,也可用新鲜配制的重铬酸钾洗液短时间浸泡,然后用水冲洗干净,倒置晾干。
26、 5.每套分光光度计上的比色皿和比色皿架不得随意更换。
27、 6.试管或试剂不得放置于仪器上,以防试剂溅出腐蚀机壳。
28、 7.如果试剂溅在仪器上,应立即用棉花或纱布擦干。
29、 8.测定溶液浓度的光密度值宜在0.1—0.7之间最符合光吸收定律,线性好,读数误差较小。
30、如光密度超过0.1—1.0范围,可调节比色液浓度,适当稀释或加浓,再进行比色。
31、 9.合上检测室盖连续工作的时间不宜过长,以防光电管疲乏。
32、每次读完比色架内的一组读数后,立即打开检测室盖。
33、 10.仪器连续使用不应超过2小时,必要时间歇半小时再用。
34、 11.测定未知液时,先作该溶液的吸收光谱曲线,再选择最大吸收峰的波长作为测定波长。
35、 12.721分光光度计的放大器暗盒及单色器箱处放有两个硅胶筒,检测室内放硅胶袋,应经常检查,发现硅胶变色,应更换新硅胶或烘干再用。
36、 13.仪器较长时间不使用,应定期通电、预热。
37、 14.仪器用完之后,须拔去电源,套上仪器罩。
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。